中华医学会呼吸病学分会呼吸危重症医学学组及中国医师协会呼吸医师分会危重症医学工作委员会联合制定了本规范,以期为ICU患者的BALF采集、送检及临床应用提供标准化流程。
三、支气管肺泡灌洗的操作流程
(二)灌洗操作
1. 部位选择:通过胸部影像学检查确定病变部位,选择病变最显著部位或进展最迅速部位进行灌洗[36‐38]。(1)局限性病变:选择病变部位,新出现或逐渐进展的浸润性病灶;(2)弥漫性病变:选择非下垂部位,推荐最佳部位为右肺中叶或左肺上叶舌段,BALF可获得最佳回收率。
2. 灌洗液选择:支气管镜顶端嵌顿于目标肺段或亚段支气管开口位置进行肺泡灌洗[39],常用的灌洗液选择0.9%无菌生理盐水,操作前加热至37 ℃(也可使用室温无菌生理盐水),用注射器经支气管镜操作孔分次快速注入,每次注入20~50 ml,常规灌洗3~5次,总量控制在60~120 ml[3,40]。
3. 负压吸引:负压管连接回收容器,进入灌洗部位前避免负压吸引,负压管连接回收容器,生理盐水注入目标肺段后,立即给予适当负压 25~100 mmHg 吸引回收 BALF[41],可采用“点吸”法吸引,减少支气管管腔塌陷,增加回收量,总回收率应>30%[2],灌洗时间控制在5 min以内为宜[38]。
4. BALF收集:为避免灌洗液细胞黏附造成损失,建议选用有机硅涂层玻璃或聚丙烯容器收集[42]。第1管BALF可能混有非病变处病原菌,影响检测结果,建议单独处理作为临床参考依据,第2管送检病原微生物检验,第3管送检细胞计数及分类,其余根据临床需要进行送检[3,42‐43]。
六、BALF的保存及送检
对于ICU患者的BALF标本,建议使用有机硅涂层玻璃或聚丙烯或其他用于悬浮组织培养的塑料无菌容器收集。送检量一般需要≥5 ml,建议10~20 ml[2]。新冠肺炎等烈性呼吸道传染病患者BALF标本要严格按照生物安全有关要求对样品进行包装盒运送,需要时,运送箱的表面可用有效氯500~1000 mg/L的含氯消毒剂擦拭或者喷洒至表面湿润进行消毒,消毒15 min。
(二)抗原抗体检验[61]
1. 病毒快速抗原及直接荧光抗体检验:室温保存≤2 h,4 ℃保存≤5 d。超过5 d,需-70 ℃保存。
2. 真菌(1-3)-β-D-葡聚糖(G试验):室温保存≤2 h,4 ℃保存≤5 d。超过5 d,需-70 ℃保存。
3. 曲霉半乳甘露聚糖抗原(Galactomannan,GM)检测:室温保存≤4 h,4 ℃保存≤24 h。超过24 h,宜在-20 ℃条件下,可存放11个月[3,61‐62]。
4. 组织胞浆菌抗原室温保存≤2 h,4 ℃保存≤72 h。
5. 皮炎芽生菌抗原4 ℃保存≤2~14 d。
6. 肺孢子菌直接荧光抗体检测室温保存≤2 h,4 ℃保存≤7 d。